原理

維生素C在260nm處有紫外吸收，使用高效液相色譜法進行測定。

色譜條件：

K2025高效液相色譜儀：K2025 P2二元高壓輸液泵、K2025 AS自動進樣器、K2025 CO柱溫箱、K2025 UVD紫外-可見光檢測器、Wookinglab色譜工作站；

色譜柱： NH2 4.6×250mm，5μm或者相當的色譜柱；

流動相：甲醇- 磷酸鹽緩沖溶液（取磷酸二氫鈉38.0g與磷酸氫二鈉5.04g，加水使溶解成1000mL，即得）；

柱溫：25℃；

進樣量：20μL；

流速：1.0mL/min；

波長：260nm。

色譜圖及結果

按照色譜條件進行采集，對樣品1和樣品2進行測試，供試品溶液色譜圖和對照溶液色譜圖如下：

樣品1的供試品及對照品色譜圖

樣品2的供試品及對照品色譜圖

空白溶液和對照溶液的疊加偏移色譜圖 

圖5 空白溶液和對照溶液的疊加偏移色譜圖

計算

通過上述數據發現，樣品1的供試品溶液中的雜質峰面積為15.987，對照溶液的峰面積為186.369，不滿足雜質峰面積的和不大于對照溶液峰面積1%的要求；樣品2供試品溶液中的雜質峰面積為15.648，對照溶液的峰面積為269.720，不滿足雜質峰面積的和不大于對照溶液峰面積1%的要求。

結論

結果表明，使用Wooking K2025 高效液相色譜儀對維生素C泡騰片中維生素C及有關物質進行測定，維生素C的理論塔板數4835，滿足國家食品藥品監督管理局標準中規定的維生素C理論塔板數不低于1500的要求；雜質峰和目標峰的分離度為2.187，滿足2020年版《中國藥典》的要求。此方法可做為維生素C泡騰片中維生素C及有關物質測定的依據。

討論